【摘 要】
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为制备猪SIgA的特异性单克隆抗体,该研究采用饱和硫酸铵盐析法从猪初乳中提取猪SIgA蛋白,分别经Sephadex G-200凝胶层析、DEAE52纤维柱离子层析及Protein A柱亲合层析纯化。
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31001080);江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(10)427、CX(09)619]
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为制备猪SIgA的特异性单克隆抗体,该研究采用饱和硫酸铵盐析法从猪初乳中提取猪SIgA蛋白,分别经Sephadex G-200凝胶层析、DEAE52纤维柱离子层析及Protein A柱亲合层析纯化。以纯化的猪SIgA蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗猪SIgA的单克隆抗体。结果显示:已获得6株特异的抗猪SIgA的单克隆抗体,分别命名为2D9E6、2D9E9、3E1G2、3E1H5、4H5B7和4H5B10,6株单抗均为IgG1,κ型。将其中1株2D9E6制备腹水,经纯化后ELISA效价可达1∶81 000以上。表明以猪SIgA天然蛋白为免疫原,成功制备了6株高特异性的单克隆抗体,可为猪黏膜免疫研究提供基础材料。
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