【摘 要】
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目的 探讨远志皂苷元对神经干细胞(neural stem cells, NSCs)增殖分化的影响及其作用机制.方法 将原代培养的 NSCs 按随机数字表法分为空白对照组,远志皂苷元低、中、高剂量
【机 构】
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解放军第一七四医院(厦门大学附属成功医院)神经医学中心,厦门,361003510182,广州医科大学中西医结合研究所;
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目的 探讨远志皂苷元对神经干细胞(neural stem cells, NSCs)增殖分化的影响及其作用机制.方法 将原代培养的 NSCs 按随机数字表法分为空白对照组,远志皂苷元低、中、高剂量组.远志皂苷元低、中、高剂量组分别加入含10、20、40 μmol/L远志皂苷元的完全培养基,空白对照组常规培养.培养4 d后,采用CCK8实验检测细胞活力、显微镜观察并计算神经球数目;Western bolt法检测巢蛋白(Nestin)、神经特异性第三类微管蛋白(neuron-specific class III β-tubulin, TUJ1)、糖原合成酶激酶-3β (glycogen synthase kinase 3β, GSK-3β)、p-GSK-3β(Ser9)的表达,免疫荧光染色观察Nestin、TUJ1的表达.结果 与空白对照组比较,远志皂苷低、中、高剂量组NSCs神经球数量[(32.78±6.30)个、(40.93±8.34)个、(45.37±7.96)个比(26.48±5.19)个]、增殖率[(127.50±9.31)%、(138.13±6.88)%、(151.25±9.38)%比(100.00±5.63)%]增加(P<0.05或 P<0.01),TUJ1蛋白[(2.21±0.14)、(3.10±0.16)、(3.30±0.15)比(1.00± 0.00)]表达升高(P<0.05),Nestin 蛋白[(0.36±0.04)、(0.53±0.05)、(0.46±0.05)比(1.00±0.00)]表达降低(P<0.05),p-GSK-3β(Ser9)/GSK-3β[(2.31±0.17)、(3.41±0.11)、(3.59±0.16)比(1.00±0.00)]表达增加(P<0.01),Nestin 阳性细胞数[(50.29±3.18)个、(45.28±6.23)个、(38.72±5.31)个比(75.27± 6.03)个]减少(P<0.05或P<0.01),TUJ1阳性细胞数[(32.23±4.36)个、(38.23±6.01)个、(46.23±4.36)个比(20.31±5.23)个]增加(P<0.01).结论 远志皂苷元可激活Wnt信号通路从而促进NSCs增殖和分化.
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