【摘 要】
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目的拟建立家蝇(Musca domestica)幼虫血淋巴中的抗真菌肽的凝胶分离方法。方法取Ⅲ龄家蝇幼虫,以白假丝酵母菌(Candida albicans)作为诱导源,采用针刺法诱导24 h后取血淋巴,
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(39970087)
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目的拟建立家蝇(Musca domestica)幼虫血淋巴中的抗真菌肽的凝胶分离方法。方法取Ⅲ龄家蝇幼虫,以白假丝酵母菌(Candida albicans)作为诱导源,采用针刺法诱导24 h后取血淋巴,加热后分别用凝胶层析和固相萃取分离活性片段,进一步用高效液相色谱法分离纯化,SDS-PAGE比较凝胶层析和固相萃取分离活性组分的区别和分离效果,采用平板滤纸片法检测抗真菌活力。结果免疫血淋巴经凝胶层析得到1个对真菌有抑制作用的组分,其活性比免疫血淋巴经固相萃取得到的1个抗菌组分稳定;SDS-PAGE电泳结果显示,经凝胶层析分离后的活性组分杂蛋白较少,相对分子质量均在14.4×103以下,而经固相萃取的活性组分杂蛋白较多,泳道中有较多大于14.4×103的片段。结论家蝇幼虫经诱导后可产生抗真菌多肽,凝胶层析法能较好地分离该抗真菌肽。
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