【摘 要】
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以E.coli MC4100染色体DNA为模板使用PCR扩增技术克隆了鸟苷酸还原酶基因guaC,该基因全长1 044 bp,编码相对分子质量为37 ku的蛋白质.将该基因直接克隆于pET-16b质粒的T7启动
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
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以E.coli MC4100染色体DNA为模板使用PCR扩增技术克隆了鸟苷酸还原酶基因guaC,该基因全长1 044 bp,编码相对分子质量为37 ku的蛋白质.将该基因直接克隆于pET-16b质粒的T7启动子下游,得到质粒pEXP1.转化E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了高效的表达.含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明,鸟苷酸还原酶的活性为不合质粒的宿主菌的80～85倍.
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