【摘 要】
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目的 观察强机械牵拉力作用下,人小梁网细胞活性及房水流出调节相关基因表达的改变.设计实验研究.研究对象人小梁网细胞.方法 依据牵拉力作用时间将原代培养的小梁网细胞分为
【机 构】
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100005,首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科研究所眼科学与视觉科学北京市重点实验室
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目的 观察强机械牵拉力作用下,人小梁网细胞活性及房水流出调节相关基因表达的改变.设计实验研究.研究对象人小梁网细胞.方法 依据牵拉力作用时间将原代培养的小梁网细胞分为0h对照、12h、24 h三组.采用FLEXCELL力学加载设备对体外培养的人小梁网细胞施加最大延伸比例为22％的机械牵拉力.用流式细胞学的方法检测各组小梁细胞的凋亡比率,采用蛋白印迹法检测细胞存活相关蛋白的表达,用定量聚合酶链式反应(qPCR)检测与房水流出调节相关的15个基因在牵张力作用下的表达量,并比较实验组与对照组间的差异.主要指标小梁网细胞凋亡率、整合素-Fak信号通路相关分子、房水流出调节相关的15个基因的表达量.结果 在牵拉力作用后,对照组、12h组、24 h组的凋亡率分别为0.71％±0.18％、0.77％±0.19％、0.87％±0.31％(P=0.7298);三组磷酸化Akt蛋白的相对表达量分别为1.00、2.17±0.06、1.69±0.07(P＜0.01);整合素信号通路中的磷酸化Fak的相对表达量分别为1.00、1.85±0.09、1.31±0.08(P＜0.01).此外,参与调节房水流出的基质金属蛋白酶l、2、3、7、9、10、11、12、14基因表达均升高(P均＜0.01);基质金属蛋白酶抑制剂1、2、3基因的表达均降低(P均＜0.01);白介素6基因相对表达量分别为1.00、1.28±0.06、1.47±0.06(P＜0.01).结论 高强度的机械牵拉能够增加小梁网细胞的活性,增强房水流出调节相关因子的表达,这可能是schlemm管成形术降低眼压的机制之一.
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