H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化

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利用PCR方法从含禽流感病毒HA基因的质粒T—HA上扩增HA基因,再将其克隆到原核表达载体pET28a中,用E.coli BL21(DE3)原核表达,SDS—PAGE和Western--blot对表达蛋白进行鉴定。Western--blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为60kD,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清特异性反应,具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV血凝素抗体具有良好的灵敏性。
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