【摘 要】
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目的：构建ABH1重组蛋白原核表达载体及建立ABH1蛋白纯化技术。方法：应用PCR技术从人的cD-NA文库扩增出ABH1基因片段,并加入限制性内切酶位点和终止子,进而将其插入到原核表达质
【机 构】
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郑州大学生物工程系,北京生命科学研究所
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目的：构建ABH1重组蛋白原核表达载体及建立ABH1蛋白纯化技术。方法：应用PCR技术从人的cD-NA文库扩增出ABH1基因片段,并加入限制性内切酶位点和终止子,进而将其插入到原核表达质粒pET-15b中,构建ABH1/15b原核表达克隆,最后用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21（DE3）中表达,用镍柱亲和纯化,离子交换层析及凝胶过滤层析三步法纯化ABH1蛋白,并采用电泳迁移率实验（EMSA）检测所纯化蛋白的DNA结合活性。结果：PCR鉴定和诱导表达阳性结果表明ABH1基因被成功构建入载体pET-15b中,
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