【摘 要】
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克隆一个与白血病复发相关基因(LRP16)的全长cDNA序列,对其进行染色体定位、组织表达谱分析,并对该基因编码蛋白质进行原核表达.首先用获得的一段3kb DNA 片段在NCBI提供的hE
【机 构】
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中国人民解放军总医院血液科,中国预防医学科学院病毒研究所,北京大学生命科学学院
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克隆一个与白血病复发相关基因(LRP16)的全长cDNA序列,对其进行染色体定位、组织表达谱分析,并对该基因编码蛋白质进行原核表达.首先用获得的一段3kb DNA 片段在NCBI提供的hESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装,再设计引物进行cDNA末端快速扩增(RACE技术).采用Northern印迹方法进行组织表达分析.以高通量基因组序列(HTGS)数据库为基础进行染色体定位.对构建的克隆菌用IPTG诱导重组蛋白表达后进行SDS-PAGE,同时对重组体测序确证.钓取了该基因全长cDNA、推导所编码的氨基酸序列,并将该基因定位于染色体11q12.2.原核表达筛选获得了该基因重组子的一个缺失体.对LRP16基因全长cDNA的序列分析提示,该基因可能编码两种N端不同的蛋白质,且该基因的转录本可能存在一种丰度较低的剪接体.
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