【摘 要】
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传统对血清中胆碱酯酶的分离纯化步骤繁琐且纯化倍数低,本实验采用硫酸铵分级沉淀、透析,再经DEAE-52离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤层析的方法,对马血清中胆碱酯酶进
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传统对血清中胆碱酯酶的分离纯化步骤繁琐且纯化倍数低,本实验采用硫酸铵分级沉淀、透析,再经DEAE-52离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤层析的方法,对马血清中胆碱酯酶进行分离纯化,得到胆碱酯酶纯品,纯化倍数达101.3倍。经SDS-PAGE不连续凝胶电泳显示为单一条带,并测定其相对分子量为72000Da。胆碱酯酶性质研究的实验结果表明,该酶最适温度为35℃,最适pH为7.4,对底物氯化乙酰胆碱的Km值为0.192mmol/L,最适底物浓度为4mmol/L,高浓度底物对酶有抑制作用,该酶对热不稳定。
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