人工合成的GFM cry11B基因在大肠杆菌中表达、纯化及抗体制备

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sweetacid

【摘要】

：

用限制性内切酶酶切的方法把人工合成的GFM cry11B基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-4T-3中，构建成重组表达质粒pGC。在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达了GST-GFMCry11B融

【作者】

：

丁敏王锋苏军陈志厚陈在杰孙明

【机构】

：

福建省农业科学院农业遗传工程重点实验室,福建省农业科学院农业遗传工程重点实验室,华中农业大学农业微生物农业部重点实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

表达 B基因抗体制备 GST 融合蛋白纯化大肠杆菌 CRY1 包涵体酶切 GFM cry11B goneprokaryotic expressionfu

【基金项目】

：

国家高技术研究与发展计划(863)(No.2002AA212031),,福建省重大科技项目(No.2003N002,No.99-Z-3),,福建省自然科学基金重点(No.B0120003)

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用限制性内切酶酶切的方法把人工合成的GFM cry11B基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-4T-3中，构建成重组表达质粒pGC。在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达了GST-GFMCry11B融合蛋白，表达量约占菌体总蛋白的21％，其表达产物主要以包涵体的形式存在。对包涵体蛋白进行可溶性处理，用Glutathione Sephrose 4B纯化出GST-Cryl1B融合蛋白。Thrombin酶切后得到Cry11B蛋白，将其作为抗原免疫家兔获得了滴度(ELISA)为1：8000的抗血清，

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