人成釉蛋白C端肽的大量表达及纯化

来源 :中国组织工程研究与临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seed_sg
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目的:获得高纯度的重组人成釉蛋白C端肽。方法:实验于2001—01/2004—06在解放军第四军医大学口腔内科实验室解放军第四军医大学基础部生物化学与分子生物学实验室完成。①转化pRSET-A/成釉蛋白原核表达质粒人BL21(DE3)细菌进行大量培养。加入诱导剂IPTG至终浓度为0.1mmol/L,32℃继续振荡诱导培养5h,收集细菌.诱导菌体的裂解上清经金属螯合亲和层析,洗脱Ni-NTA结合蛋白,收集洗脱蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定。②离子交换层析缓冲液(pH7.4,50mmol/L Tris
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