目的采用浓度梯度法诱导建立人膀胱癌顺铂耐药细胞系(T24/DDP),并观察其生物学特性。方法利用人膀胱癌细胞株T24,采用顺铂(DDP)作为诱导剂在体外建立人膀胱癌顺铂耐药细胞模型T24/DDP(0.6μg/m L)。通过倒置相差显微镜下观察T24、T24/DDP细胞形态,MTT法检测细胞多药耐药性,生长曲线检测细胞的增殖能力,流式细胞术测细胞的周期,q RT-PCR检测耐药基因MRP(multidrug resistance-associated protein)的表达。结果经过顺铂14个月的诱导,成功建立了T24/DDP。倒置相差显微镜下观察与T24细胞相比较,T24/DDP排列不规则,形态出现多形性,出现巨细胞;与T24相比较,T24/DDP对顺铂、阿霉素、长春新碱、甲氨蝶呤均产生不同程度的交叉耐药,比T24细胞倍增时间明显延长,细胞周期中G1期细胞增多,G2、S期细胞减少。q RT-PCR结果显示,耐药细胞MRP基因的表达明显高于亲本细胞。结论人膀胱癌耐顺铂细胞株T24/DDP具有多药耐药性,可以作为研究膀胱癌细胞多药耐药的良好实验模型。