【摘 要】
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目的通过原核基因工程技术获得登革2型病毒(DENV2)包膜蛋白第Ⅲ结构域(EDⅢ)重组蛋白,检测其抑制登革病毒感染细胞的效率。方法利用聚合酶链反应技术扩增DENV2编码EDⅢ重组蛋
【机 构】
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广东省佛山市顺德区勒流医院检验科,广州中医药大学第二临床医学院医学检验部
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目的通过原核基因工程技术获得登革2型病毒(DENV2)包膜蛋白第Ⅲ结构域(EDⅢ)重组蛋白,检测其抑制登革病毒感染细胞的效率。方法利用聚合酶链反应技术扩增DENV2编码EDⅢ重组蛋白的基因片段,构建pET28b(+)-EDⅢ原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导EDⅢ重组蛋白表达,进行质谱鉴定。将登革病毒感染VeroE6细胞(经EDⅢ重组蛋白孵育),根据空斑减少数量计算EDⅢ重组蛋白对登革病毒感染的抑制率。结果成功表达并纯化EDⅢ重组蛋白。EDⅢ重组蛋白可以抑制登革病毒感染的VeroE6细胞,且抑制率与蛋白水平
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