【摘 要】
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【目的】构建小鼠DVL3基因野生型及突变型重组荧光素酶报告质粒,验证miR-204与DVL3的靶向关系。【方法】采用生物信息学方法预测miR-204与DVL3基因的结合位点。采用PCR法扩增小鼠DVL3基因3’UTR片段,克隆至pGL3-control载体,构建野生型及突变型重组荧光素酶报告质粒。293T细胞分为6组,分别将野生型与突变型荧光素酶质粒与miR-204过表达质粒以及对照质粒共转染,检测6组细胞中荧光素酶的活性。【结果】电泳和测序结果证实成功构建小鼠野生型和突变型DVL3基因重组荧光素酶报告质
【基金项目】
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中国疾病预防控制中心化学污染与健康安全重点实验室开放基金(2021CDCKL01),天津市青年医学新锐人才项目(2018)。
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【目的】构建小鼠DVL3基因野生型及突变型重组荧光素酶报告质粒,验证miR-204与DVL3的靶向关系。【方法】采用生物信息学方法预测miR-204与DVL3基因的结合位点。采用PCR法扩增小鼠DVL3基因3’UTR片段,克隆至pGL3-control载体,构建野生型及突变型重组荧光素酶报告质粒。293T细胞分为6组,分别将野生型与突变型荧光素酶质粒与miR-204过表达质粒以及对照质粒共转染,检测6组细胞中荧光素酶的活性。【结果】电泳和测序结果证实成功构建小鼠野生型和突变型DVL3基因重组荧光素酶报告质
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