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目的
应用比较蛋白质组学研究与大肝癌根治术后复发相关的蛋白质分子标志物。
方法利用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)结合二维液相色谱-串联质谱技术(2DLC-MS/MS)分析6个月内复发组(R≤6 m组，n＝9)、6～12个月复发组(R6-12 m组，n＝9)、2年内未复发组(R>24 m，n＝6)组肝癌标本，筛选不同复发时间的肝癌组织差异表达蛋白。通过荧光定量聚合酶链反应法(FQ-PCR)和Western blot对验证组患者(新鲜冰冻标本，n＝30)进行差异蛋白验证；同时对验证的蛋白进行免疫组织化学分析(肝癌石蜡切片标本，n＝201)并将结果与临床病理资料进行Cox回归分析。
结果筛选出10个随复发时间不同而变化较大的差异蛋白质，其中5个上调：钙结合蛋白A9(S100A9)、髓过氧化物酶(MPO)、载脂蛋白A4(APOA4)、跨膜蛋白97(TMEM97)、人核受体hblf(NR5A2)；5个下调：脱氢酶/还原酶2(DHRS2)、三四氨基酸重复结构域4(TTC4)、染色质重构因子(CHD2)、4-羟苯丙酮酸双氧酶(HPD)、亚甲胺转移酶-环化脱氨酶(FTCD)。FQ-PCR和Western blot验证结果显示，TMEM97在组织中的表达与质谱结果一致。免疫组织化学及Cox分析显示，TMEM97高表达、术前高血清甲胎蛋白(AFP)、肿瘤多发、肿瘤直径较大、有肉眼癌栓、有微血管癌栓、包膜不完整、术中输血为术后复发的独立危险因素。
结论大肝癌术后复发与多蛋白相关，TMEM97可能作为大肝癌根治术后复发相关的预警蛋白。