观察半乳糖凝集素-1(GAL-1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及与患者临床特征和预后的关系。
方法利用癌症基因组图谱(TCGA)中424例样本和肝癌组织芯片84例样本分别分析GLA-1 mRNA和蛋白在HCC中的表达,及其与HCC患者的临床特征及总体生存率(OS)时间的关系。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法和Western blot检测GLA-1在LO2细胞和Huh7细胞系中的表达,应用小干扰RNA(siRNA)下调GLA-1 mRNA后,噻唑蓝(MTT)、Transwell、克隆成形实验分别检测不同分组Huh7细胞系的增殖能力、侵袭能力和克隆成形能力。
结果在TCGA数据库中,GLA-1 mRNA在肝癌中的表达水平高于在癌旁中的表达(11.930±0.056比11.600±0.081,t=2.112,P=0.035);GLA-1 mRNA高表达患者的OS时间低于低表达者[(4.757±0.410)年比(6.207±0.485)年,Log Rank值=8.368,P=0.004];临床特征分析表明,GLA-1 mRNA与患者的TNM分期呈正相关(χ2=3.859,P=0.049);GLA-1 mRNA是预后的独立预测因素(r=1.644,P=0.012)。在84例组织芯片中,存在转移和复发患者的GLA-1蛋白评分高于无转移和复发者(2.391±0.114比0.895±0.155,t=45.260,P=0.000),(2.375±0.128比1.114±0.160,t=39.930,P=0.000),且GLA-1蛋白高表达患者的OS时间显著低于低表达者[(2.801±0.393)年比(3.291±0.479)年,Log Rank值=4.125,P=0.018],GLA-1蛋白也是预后的独立预测因素(r=1.857,P=0.009)。GLA-1 mRNA和蛋白在Huh7细胞中表达较LO2细胞高4倍,GLA-1下调组增殖在72 h[(69.580±2.341)%,t=12.990,P=0.006]和96 h[(70.390±3.782)%,t=7.830,P=0.016]时较阴性对照组明显抑制,侵袭细胞数(20.670±0.882比47.000±1.155,t=18.120,P=0.000)和克隆成形数(33.330±0.882比73.000±1.155,t=27.300,P=0.000)较阴性对照组明显降低。
结论GLA-1 mRNA和蛋白的高表达提示肝癌患者更短的总生存期,有助于监测肝癌发病及转移,是不良预后的独立预测因素。