诱导条件对人线粒体色氨酰-tRNA合成酶表达的影响

来源 :中国生化药物杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HUANGKAO2
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目的优化人线粒体色氨酰-tRNA合成酶(hmt TrpRS)的表达条件。方法构建表达载体pET-24a(+)-hmt TrpRS,转化到大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中。分析异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、诱导时间和诱导温度对hmt TrpRS表达的影响。结果确定IPTG浓度为0.1mmol/L,30℃诱导4h,为诱导蛋白表达较合适条件。同时利用特异性的Ni亲和柱色谱纯化了目的蛋白。结论获得较合适的表达条件,并纯化得到较高纯度的hmt TrpRS.为以后该酶结构、功
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