【摘 要】
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基因编辑技术已成为医学生物学研究的重要工具,将不同基因快速高效地富集到基因编辑阳性细胞并进行针对性研究是促进基因编辑技术发展的关键.近年来,基于非同源末端接合、同
【机 构】
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药物质量与安全预警教育部重点实验室,中国药科大学,南京210009;东部战区总医院药理科,南京,210002;东部战区总医院药理科,南京210002
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基因编辑技术已成为医学生物学研究的重要工具,将不同基因快速高效地富集到基因编辑阳性细胞并进行针对性研究是促进基因编辑技术发展的关键.近年来,基于非同源末端接合、同源直接修复、单链退火、倒位重排等基因组修复机制,研究者利用荧光蛋白或抗性标签基因修复后表达的原理,建立了多种可用于基因编辑阳性细胞筛选与富集的报告系统.富集后的细胞采用T7 E1酶切法或测序技术进行突变分析,呈现显著降低的背景信号和增加的突变比例.此类报告系统有利于基因编辑效果的表征.此外,分选后的阳性细胞可继续培养,在突变细胞系构建及突变细胞功能研究等领域具有良好的发展前景.本文对这些报告系统的设计原理与应用进行了总结,以期为建立更加完善的基因编辑评价系统提供参考.
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