【摘 要】
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旨在研究外源性神经肽可卡因-苯丙胺调节转录因子（cocaine-and amphetamine-regulated transcript, CART）抵抗海马神经元氧化应激的效果及机制。本研究取初生24 h内大鼠海马进行神经元的原代培养,经纯度检测后,用200μmol·mL-1过氧化氢诱导以构建氧化应激模型。在此基础上,分析CART对神经元活率、ATP含量、线粒体膜电位（mitochondrial
【基金项目】
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重庆市留创基金项目（cx2018096）； 中央高校基本科研业务专项基金（XDJK2020B014）； 重庆市生猪产业技术体系创新团队资助项目；
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旨在研究外源性神经肽可卡因-苯丙胺调节转录因子（cocaine-and amphetamine-regulated transcript, CART）抵抗海马神经元氧化应激的效果及机制。本研究取初生24 h内大鼠海马进行神经元的原代培养,经纯度检测后,用200μmol·mL-1过氧化氢诱导以构建氧化应激模型。在此基础上,分析CART对神经元活率、ATP含量、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP）和凋亡通路相关基因以及trkB基因表达的影响,并对trkB基因与凋亡相关蛋白和基因的表达进行相关性分析。结果显示,与对照组相比,H2O2组中的神经元活率及ATP含量极显著降低（P<0.01）,MMP值显著降低（P<0.05）;与H2O2组相比,添加不同浓度的CART使海马神经元活率、ATP含量和MMP值显著增加（P<0.05）。与对照组相比,H2O2组中bax、caspase-3的mRNA水平极显著增加（P<0.01）,bcl-2（P<0.01）、trkB（P<0.05）的mRNA水平分别极显著和显著降低;与H2O2组相比,CART+H2O2组中bcl-2的mRNA水平极显著升高（P<0.01）,而trkB的mRNA水平显著升高（P<0.05）,同时bax的mRNA水平显著降低（P<0.05）,而caspase-3的mRNA水平则极显著降低（P<0.01）。Western blot分析结果显示,与对照组相比,H2O2组中bax、caspase-3的蛋白质水平显著升高（p<0.05）,bcl-2、trkB的蛋白质水平显著降低（P<0.05）;与H2O2组相比,CART+H2O2组中bcl-2、trkB的蛋白质水平显著升高（P<0.05）,而bax、caspase-3的蛋白质水平显著降低（P<0.05）。相关性分析结果显示,trkB基因与bax、caspase-3基因的表达呈显著负相关,而与bcl-2基因的表达呈显著正相关。结果提示,CART在增加氧化应激海马神经元中trkB基因表达水平的同时,可通过削弱凋亡信号通路抵抗海马神经元氧化应激。
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