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摘要： 建立了离心处理-固相萃取-气相色谱法-电子捕获检测器同时测定黄瓜中的六氯苯等9种农药残留的方法。该方法是将样品用乙腈提取，经SPE小柱（弗罗里硅土）净化，采用电子捕获检测器测定，外标法定量，分别对黄瓜进行3个水平（其中7种为0 02、0 04、0 08 mg/kg，敌稗和丁草胺为0 04、0 08、0 16 mg/kg ）的添加回收试验，平均添加回收率为57 1%～134 8 %，RSD为2 4%～13 0%，方法的最低检测限为0 000 9～0 027 4 mg/kg，在103的范围内线性较好，相关系数r≥0 998 7。试验结果表明，本方法灵敏度高、重复性好，可以作为蔬菜中这几种农残的测定方法。9种农药在黄瓜基质中存在不同程度的基质效应，其中敌稗和丁草胺存在较强的基质抑制效应，其他几种存在较弱的基质增强效应。
关键词： 黄瓜；农药；除草剂；电子捕获检测器；外标法；基质效应
中图分类号： TQ450 2 63 文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2015）08-0299-03
近年来为了节省劳力，有机氯类除草剂在生产中被越来越多的使用，有机氯农药是一类曾被世界各国广泛使用的高效、广谱杀虫剂，虽然禁用多年，但由于其半衰期长、不易降解，所以长期积存于植物和土壤中，至今仍有检出 [1-2]。七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂是氯化环戊二烯杀虫剂，六氯苯和氯硝胺是杀菌剂，敌稗和丁草胺是除草剂，胺菊酯是拟除虫菊酯，这些农药对动物具有致畸、致癌和致突变等毒性 [3]。目前检测这类农药较普遍使用气相色谱法 [4-6]、气相色谱串联质谱法 [7-8]；刘长武等在标准NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》 [9]中列举了用GC-ECD检测的农药种类，但没有具体的测定数据。为了快速对这几种农药进行测定，笔者进行了固相萃取-气相色谱法-电子捕获检测器同时测定黄瓜中的六氯苯等多种农药残留的试验，经过在0 02、0 04、0 08 mg/kg（敌稗和丁草胺为0 04、0 08、0 16 mg/kg）3个水平下的添加回收试验，结果表明该方法能满足日常检测的需要。
1 试验部分
1 1 试验仪器与试剂
瓦里安CP3800，配8400自动进样器和ECD检测器，其色谱柱为VF-5，30 m×0 32 mm，液膜厚0 25 μm；WH-861型涡旋混合器；天孚牌电子计数天平（DT 500A）；德国Heidolph SilentCrusher M型均质机；美国N-EVAPTM-112型氮吹仪；德国Hettich Universal 302R离心机。
乙腈、正己烷、丙酮为CNW品牌试剂（HPLC级）；NaCl为天津市科密欧化学试剂开发中心生产的绿环牌试剂（分析纯级）；农药标准品七氯（heptachlor）、艾氏剂（aldrin）、狄氏剂（dieldrin）、异狄氏剂（endrin）、六氯苯（hexachlorobenzene）、氯硝胺（dichloran）、敌稗（propanil）、丁草胺（butachlor）和胺菊酯（tetramethrin），浓度均为100 mg/kg，由农业环境保护科研检测所生产。
1 2 GC条件
进样口温度：220 ℃；检测器温度：300 ℃；柱温箱：程序升温，起始温度150 ℃，保持0 5 min，以20 ℃/min升至200 ℃，保持2 min，以 0 8 ℃/min升至210 ℃，保持2 min，以 50 ℃/min 升至260 ℃，保持10 min ；柱流量：2 mL/min；分流比：1 ∶ 10；进样量：1 μL。
1 3 样品前处理
称取25 g样品于250 mL广口瓶中，在广口瓶中加入5～7 g NaCl，再加入50 mL乙腈，依照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》 [9]的方法，用均质机在8 000～12 000 r/min下均质提取2 min，之后一并倒入2支50 mL的离心管中，放入离心机中在5 000 r/min下离心5 min，移取上层乙腈相10 mL浓缩至近干，用2 mL正己烷定容，之后用弗罗里硅土SPE小柱净化，再次浓缩至近干，用正己烷定容至5 mL 。根据保留时间定性，用基质匹配标准溶液校正，外标法定量，单点校正。
1 4 标准溶液的配制
分别准确吸取“1 1”节中标准溶液各1 mL，置10 mL容量瓶中，用正己烷定容至10 mL，成为10 mg/kg 的混合标准溶液，备用。用黄瓜样品基质稀释成低浓度标准溶液上机测定。
2 结果与分析
2 1 基质效应
9种化合物的色谱图、用样品空白基质配制的标准品的色谱图和黄瓜空白基质的色谱图分别见图1、图2、图3，由图1、图2、图3可以看出，黄瓜样品基质中存在一些干扰物，在VF-5的柱子上和六氯苯、敌稗和丁草胺分不开，从而对这3种物质的测定存在较大的影响。其中在敌稗和丁草胺的保留时间附近均有1个较大的倒峰，对二者存在严重的基质抑制效应，基质抑制程度随着标准品浓度的增大而减小；在六氯苯的保留时间附近有1个较小的正峰，使六氯苯有较弱的基质增强效应。其他几种农药也存在不同程度的基质增强效应，有待于进一步研究。
2 2 回收率和精密度试验
分别称取25 g黄瓜空白样品，添加9种农药的混合标准溶液和单标，使添加后六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、胺菊酯的浓度分别为0 02、0 04、0 08 mg/kg，使敌稗和丁草胺的浓度分别为0 04、0 08、0 16 mg/kg，按照“13”节中的步骤进行样品前处理，每个水平的试样重复测定12次，根据测定结果计算添加回收率，在12个添加回收中弃去2个离群值，结果见表1。试验结果（表1）表明，本方法的回收率范围为57 1%～134 8%，精密度为2 4%～130%。六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、胺菊酯的检出限在0 08 mg/kg的水平下，敌稗和丁草胺在 0 16 mg/kg 的水平下来计算，计算公式为： DL=[SX（]3NC[]h[SX）] [10]。
式中：DL代表方法的检测限（方法可检测到的最小样品量）；N代表基线噪声；C代表样品浓度；h代表相应的农药的峰高。
计算结果表明，9种化合物的检测限为0 000 9～0 027 4 mg/kg， 本方法的回收率、精密度和检测限均满足多种农药残留检测分析的要求。
2 3 检测限和线性范围
笔者在试验中分别用正己烷配制了0 001、0 01、0 1、1、10 mg/kg 5个浓度水平的混合标准溶液，9种农药的线性回归方程、线性范围和相关系数见表2 。 因为敌稗和丁草胺的响应较低，在0 001 mg/kg浓度水平下几乎可以视为没有响应，它们在0 01～10 mg/kg的范围内相关系数分别是0 998 8 和0 999 3，其他7种农药在0 001～10 mg/L范围内相关系数均小于0 01～10 mg/L的相关系数，线性均不如在0 01～10 mg/L的范围内的线性好，在0 001～1 mg/kg的范围内相关系数均大于0998 5；另外用黄瓜空白基质配制了0 01、002、0 04、008、0 16 mg/kg 5个浓度水平的标准品，同样，敌稗在001、0 02 mg/kg 的浓度水平下，因为基质效应，可以视为没有响应，在0 04～0 16 mg/kg的范围内相关系数是0991 2，其他8种农药在0 01～0 16 mg/kg的范围内相关系数均大于0993 5。可见，用黄瓜空白基质作为介质配制的标准溶液的线性范围不如用正己烷试剂作为介质配制的标准溶液，但在一定的范围内其线性可以满足多种农药残留分析的要求；同时，在日常检测工作中为了避免基质效应带来的影响，可以用相近浓度的基质匹配标准溶液来进行校正。
3 结论
本方法采用固相萃取的前处理技术，建立了气相色谱-电子捕获检测器测定黄瓜中多种有机氯农药残留量的方法，获得了满意的分离效果和检测灵敏度，方法的准确度、精密度、线性范围、相关系数、检出限等均能满足多种农药残留分析的要求。但是黄瓜基质在VF-5的柱子上对敌稗和丁草胺的影响较大，建议在检测工作中用相近浓度的基质匹配标准溶液来进行校正。
参考文献：
[1] 郝丽丽，薛 健 银杏叶中18种有机氯农药的多残留分析[J] 分析化学，2006，34（2）：231-234
[2]申中兰，蔡继宝，高 芸，等 基质固相分散-加速溶剂萃取-气相色谱法测土壤中有机氯农药残留[J] 分析化学，2005，33（9）：1318-1320
[3]苗建材，王淑英，张作芳，等 最新农药使用技术手册[J] 哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1992：12
[4]石 杰，杨 静，刘慧民，等 超声波提取-固相萃取净化-气相色谱法分析烟草中拟除虫菊酯类农药及氟节胺残留[J] 分析试验室，2010，29（4）：22-24
[5]朱学良，戚向阳，岳晶念，等 基质固相分散气相色谱电子捕获检测器测定葡萄酒中5种农药残留[J] 分析化学，2007，35（2）：259-262
[6]万益群，陈宗保 土壤中多种有机氯及拟除虫菊酯类农药的 GC-ECD 测定[J] 分析试验室，2006，25（9）：60-63
[7]周相娟，赵玉琪，许 华 气相色谱-质谱法测定化妆品中16种有机氯农药[J] 分析试验室，2013，32（12）：74-78
[8]颜鸿飞，黄志强，张 莹，等 气相色谱-质谱法测定茶叶中29种酸性除草剂的残留量[J] 色谱，2009，27（3）：288-293
[9]刘长武，刘潇威，刘凤芝，等 NY/T 761—2008 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S] 2008
[10] 刘虎威 气相色谱方法及应用[J] 北京：化学工业出版社，2000：29
关键词： 黄瓜；农药；除草剂；电子捕获检测器；外标法；基质效应
中图分类号： TQ450 2 63 文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2015）08-0299-03
近年来为了节省劳力，有机氯类除草剂在生产中被越来越多的使用，有机氯农药是一类曾被世界各国广泛使用的高效、广谱杀虫剂，虽然禁用多年，但由于其半衰期长、不易降解，所以长期积存于植物和土壤中，至今仍有检出 [1-2]。七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂是氯化环戊二烯杀虫剂，六氯苯和氯硝胺是杀菌剂，敌稗和丁草胺是除草剂，胺菊酯是拟除虫菊酯，这些农药对动物具有致畸、致癌和致突变等毒性 [3]。目前检测这类农药较普遍使用气相色谱法 [4-6]、气相色谱串联质谱法 [7-8]；刘长武等在标准NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》 [9]中列举了用GC-ECD检测的农药种类，但没有具体的测定数据。为了快速对这几种农药进行测定，笔者进行了固相萃取-气相色谱法-电子捕获检测器同时测定黄瓜中的六氯苯等多种农药残留的试验，经过在0 02、0 04、0 08 mg/kg（敌稗和丁草胺为0 04、0 08、0 16 mg/kg）3个水平下的添加回收试验，结果表明该方法能满足日常检测的需要。
1 试验部分
1 1 试验仪器与试剂
瓦里安CP3800，配8400自动进样器和ECD检测器，其色谱柱为VF-5，30 m×0 32 mm，液膜厚0 25 μm；WH-861型涡旋混合器；天孚牌电子计数天平（DT 500A）；德国Heidolph SilentCrusher M型均质机；美国N-EVAPTM-112型氮吹仪；德国Hettich Universal 302R离心机。
乙腈、正己烷、丙酮为CNW品牌试剂（HPLC级）；NaCl为天津市科密欧化学试剂开发中心生产的绿环牌试剂（分析纯级）；农药标准品七氯（heptachlor）、艾氏剂（aldrin）、狄氏剂（dieldrin）、异狄氏剂（endrin）、六氯苯（hexachlorobenzene）、氯硝胺（dichloran）、敌稗（propanil）、丁草胺（butachlor）和胺菊酯（tetramethrin），浓度均为100 mg/kg，由农业环境保护科研检测所生产。
1 2 GC条件
进样口温度：220 ℃；检测器温度：300 ℃；柱温箱：程序升温，起始温度150 ℃，保持0 5 min，以20 ℃/min升至200 ℃，保持2 min，以 0 8 ℃/min升至210 ℃，保持2 min，以 50 ℃/min 升至260 ℃，保持10 min ；柱流量：2 mL/min；分流比：1 ∶ 10；进样量：1 μL。
1 3 样品前处理
称取25 g样品于250 mL广口瓶中，在广口瓶中加入5～7 g NaCl，再加入50 mL乙腈，依照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》 [9]的方法，用均质机在8 000～12 000 r/min下均质提取2 min，之后一并倒入2支50 mL的离心管中，放入离心机中在5 000 r/min下离心5 min，移取上层乙腈相10 mL浓缩至近干，用2 mL正己烷定容，之后用弗罗里硅土SPE小柱净化，再次浓缩至近干，用正己烷定容至5 mL 。根据保留时间定性，用基质匹配标准溶液校正，外标法定量，单点校正。
1 4 标准溶液的配制
分别准确吸取“1 1”节中标准溶液各1 mL，置10 mL容量瓶中，用正己烷定容至10 mL，成为10 mg/kg 的混合标准溶液，备用。用黄瓜样品基质稀释成低浓度标准溶液上机测定。
2 结果与分析
2 1 基质效应
9种化合物的色谱图、用样品空白基质配制的标准品的色谱图和黄瓜空白基质的色谱图分别见图1、图2、图3，由图1、图2、图3可以看出，黄瓜样品基质中存在一些干扰物，在VF-5的柱子上和六氯苯、敌稗和丁草胺分不开，从而对这3种物质的测定存在较大的影响。其中在敌稗和丁草胺的保留时间附近均有1个较大的倒峰，对二者存在严重的基质抑制效应，基质抑制程度随着标准品浓度的增大而减小；在六氯苯的保留时间附近有1个较小的正峰，使六氯苯有较弱的基质增强效应。其他几种农药也存在不同程度的基质增强效应，有待于进一步研究。
2 2 回收率和精密度试验
分别称取25 g黄瓜空白样品，添加9种农药的混合标准溶液和单标，使添加后六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、胺菊酯的浓度分别为0 02、0 04、0 08 mg/kg，使敌稗和丁草胺的浓度分别为0 04、0 08、0 16 mg/kg，按照“13”节中的步骤进行样品前处理，每个水平的试样重复测定12次，根据测定结果计算添加回收率，在12个添加回收中弃去2个离群值，结果见表1。试验结果（表1）表明，本方法的回收率范围为57 1%～134 8%，精密度为2 4%～130%。六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、胺菊酯的检出限在0 08 mg/kg的水平下，敌稗和丁草胺在 0 16 mg/kg 的水平下来计算，计算公式为： DL=[SX（]3NC[]h[SX）] [10]。
式中：DL代表方法的检测限（方法可检测到的最小样品量）；N代表基线噪声；C代表样品浓度；h代表相应的农药的峰高。
计算结果表明，9种化合物的检测限为0 000 9～0 027 4 mg/kg， 本方法的回收率、精密度和检测限均满足多种农药残留检测分析的要求。
2 3 检测限和线性范围
笔者在试验中分别用正己烷配制了0 001、0 01、0 1、1、10 mg/kg 5个浓度水平的混合标准溶液，9种农药的线性回归方程、线性范围和相关系数见表2 。 因为敌稗和丁草胺的响应较低，在0 001 mg/kg浓度水平下几乎可以视为没有响应，它们在0 01～10 mg/kg的范围内相关系数分别是0 998 8 和0 999 3，其他7种农药在0 001～10 mg/L范围内相关系数均小于0 01～10 mg/L的相关系数，线性均不如在0 01～10 mg/L的范围内的线性好，在0 001～1 mg/kg的范围内相关系数均大于0998 5；另外用黄瓜空白基质配制了0 01、002、0 04、008、0 16 mg/kg 5个浓度水平的标准品，同样，敌稗在001、0 02 mg/kg 的浓度水平下，因为基质效应，可以视为没有响应，在0 04～0 16 mg/kg的范围内相关系数是0991 2，其他8种农药在0 01～0 16 mg/kg的范围内相关系数均大于0993 5。可见，用黄瓜空白基质作为介质配制的标准溶液的线性范围不如用正己烷试剂作为介质配制的标准溶液，但在一定的范围内其线性可以满足多种农药残留分析的要求；同时，在日常检测工作中为了避免基质效应带来的影响，可以用相近浓度的基质匹配标准溶液来进行校正。
3 结论
本方法采用固相萃取的前处理技术，建立了气相色谱-电子捕获检测器测定黄瓜中多种有机氯农药残留量的方法，获得了满意的分离效果和检测灵敏度，方法的准确度、精密度、线性范围、相关系数、检出限等均能满足多种农药残留分析的要求。但是黄瓜基质在VF-5的柱子上对敌稗和丁草胺的影响较大，建议在检测工作中用相近浓度的基质匹配标准溶液来进行校正。
参考文献：
[1] 郝丽丽，薛 健 银杏叶中18种有机氯农药的多残留分析[J] 分析化学，2006，34（2）：231-234
[2]申中兰，蔡继宝，高 芸，等 基质固相分散-加速溶剂萃取-气相色谱法测土壤中有机氯农药残留[J] 分析化学，2005，33（9）：1318-1320
[3]苗建材，王淑英，张作芳，等 最新农药使用技术手册[J] 哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1992：12
[4]石 杰，杨 静，刘慧民，等 超声波提取-固相萃取净化-气相色谱法分析烟草中拟除虫菊酯类农药及氟节胺残留[J] 分析试验室，2010，29（4）：22-24
[5]朱学良，戚向阳，岳晶念，等 基质固相分散气相色谱电子捕获检测器测定葡萄酒中5种农药残留[J] 分析化学，2007，35（2）：259-262
[6]万益群，陈宗保 土壤中多种有机氯及拟除虫菊酯类农药的 GC-ECD 测定[J] 分析试验室，2006，25（9）：60-63
[7]周相娟，赵玉琪，许 华 气相色谱-质谱法测定化妆品中16种有机氯农药[J] 分析试验室，2013，32（12）：74-78
[8]颜鸿飞，黄志强，张 莹，等 气相色谱-质谱法测定茶叶中29种酸性除草剂的残留量[J] 色谱，2009，27（3）：288-293
[9]刘长武，刘潇威，刘凤芝，等 NY/T 761—2008 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S] 2008
[10] 刘虎威 气相色谱方法及应用[J] 北京：化学工业出版社，2000：29