评价活性氧(ROS)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在地氟烷预处理减轻脂多糖(LPS)诱导大鼠脑急性炎症中的作用。
方法清洁级健康雄性SD大鼠120只，8～10周龄，体重200～250 g，采用随机数字表法分为4组(n＝30)：对照组(C组)、脑急性炎症组(L组)、地氟烷预处理组(D组)和N-乙酰半胱氨酸＋地氟烷预处理组(ND组)。L组、D组和ND组采用尾静脉注射LPS 1 mg/kg的方法制备大鼠脑急性炎症模型；D组吸入8.2%地氟烷1 h，每天1次，连续5 d进行预处理，第5次吸入停止后24 h时注射LPS；ND组每次吸入地氟烷前30 min，腹腔注射ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸150 mg/kg，其余操作同D组。于LPS注射前(最后1次地氟烷预处理后24 h)时采用免疫荧光双标法测定海马CA1区小胶质细胞和星形胶质细胞的Nrf2和Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)表达；于LPS注射后6、12和24 h时采用Morris水迷宫实验测定逃避潜伏期、原平台象限探索时间和穿越平台次数，采用免疫荧光双标法测定海马CA1区小胶质细胞和星形胶质细胞的NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、IL-18和IL-1β的表达；于LPS注射后24 h时采用尼氏染色和免疫荧光法分别计数海马正常神经元、活化小胶质细胞和星形胶质细胞。
结果与C组比较，L组LPS注射前海马小胶质细胞和星形胶质细胞Nrf2和Keap1表达差异无统计学意义(P>0.05)，LPS注射后逃避潜伏期延长，原平台象限探索时间缩短，穿越原平台次数减少，海马正常神经元数量降低，小胶质细胞和星形胶质细胞活化数量增多，NLRP3、ASC、caspase-1、IL-18和IL-1β表达上调(P<0.05)；与L组比较，D组LPS注射前海马小胶质细胞和星形胶质细胞Nrf2表达上调，Keap1表达下调(P<0.05)，LPS注射后逃避潜伏期缩短，原平台象限探索时间延长，穿越原平台次数增多，海马正常神经元数量增多，小胶质细胞和星形胶质细胞活化数量减少，NLRP3、ASC、caspase-1、IL-18和IL-1β表达下调(P<0.05)；与D组比较，ND组LPS注射前海马小胶质细胞和星形胶质细胞Nrf2表达下调，Keap1表达上调(P<0.05)，LPS注射后逃避潜伏期延长，原平台象限探索时间缩短，穿越原平台次数减少，海马正常神经元数量减少，小胶质细胞和星形胶质细胞活化数量增多，NLRP3、ASC、caspase-1、IL-18和IL-1β表达上调(P<0.05)。
结论ROS/Nrf2信号通路参与了地氟烷预处理减轻LPS诱导大鼠脑急性炎症的过程。