【摘 要】
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为探索适于烟草根系蛋白质组学研究的样品制备方法,以栽培品种K326生长期根系为材料,比较了常规裂解液法、TCA/丙酮沉淀法、Trizol抽提法和酚法等4种总蛋白质的提取方法。对
【机 构】
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贵州省烟草科学研究所,北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室
【基金项目】
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中国烟草总公司重点项目“烤烟育种新技术与新一代烤烟新品种选育研究”（2010-221）, 贵州省科技厅农业攻关项目“烤烟种质资源鉴定与创新及新品种选育研究”（2011-3047）
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为探索适于烟草根系蛋白质组学研究的样品制备方法,以栽培品种K326生长期根系为材料,比较了常规裂解液法、TCA/丙酮沉淀法、Trizol抽提法和酚法等4种总蛋白质的提取方法。对制备的样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及双向电泳（2-DE）检测。结果表明：酚法最佳,所获蛋白在单向SDS-PAGE中形成条带数目多而清晰;经双向电泳分离用银染显色,可检测约548个蛋白点,图谱分辨率较好,蛋白点清晰,主要集中在等电点pH5～8、相对分子量25.0～70.0kD,可有效解析烟草根系的蛋白质组。
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