探讨小鼠创伤性脑损伤(TBI)后急性期碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对血脑屏障中周细胞的作用。
方法选取90只C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为假手术组(只开骨窗不损伤)、TBI组和给药组(TBI+bFGF组),每组30只。采用皮质打击法建立中度TBI模型。造模24 h后采用Garcia神经学评分评价神经功能变化。腹腔注射伊文思蓝行血脑屏障通透性检测。分离大脑皮层,用Western blot法检测周细胞血小板衍生长因子受体-β(PDGFR-β)、氨肽酶N(CD13)、结蛋白、神经胶质细胞2型硫酸软骨素糖蛋白(NG2)及内参甘油三磷酸脱氢酶(GAPDH)的变化。HE染色观察组织形态学变化,免疫荧光染色法检测PDGFR-β、CD13、细胞表面糖蛋白MUC18(CD146)的变化。
结果TBI组Garcia神经学评分较假手术组明显下降(P<0.01),TBI+bFGF组神经学评分较TBI组明显增加(P<0.05)。TBI组通透性较假手术组明显增加(P<0.01),TBI+bFGF组较TBI组通透性明显减少(P<0.01)。Western blot结果显示TBI组PDGFR-β、CD13、结蛋白、NG2表达较假手术组明显下降(P均<0.05),TBI+bFGF组PDGFR-β、CD13、结蛋白、NG2表达较TBI组明显上升(P均<0.05)。HE染色结果显示,与假手术组和TBI+bFGF组比较,TBI组脑组织破坏严重,受压损伤深度变深,可见出血灶,血管结构消失。免疫荧光染色结果显示,TBI组PDGFR-β、CD13、CD146表达较假手术组明显下降(P均<0.01),TBI+bFGF组PDGFR-β、CD13、CD146表达较TBI组明显上升(P均<0.05)。
结论小鼠TBI后bFGF可以保护周细胞的相关蛋白,减少周细胞死亡,从而保护血脑屏障,减轻大脑皮层的损伤程度。