论文部分内容阅读
用RT—PCR扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）重庆分离株C14—2的ORF7基因（384bp），构建克隆质粒pMD19-T—ORF7，经EcoRI／NotI双酶切回收ORF7基因插入酵母表达载体pPIC9K，构建了重组表达质粒DPIC9K—ORF7，进行PCR鉴定和双酶切鉴定。鉴定的pPIC9K—ORF7经SacI线性化后电转化毕赤酵母宿主茵GS115，筛选获得阳性重组茵GS115（pPIC9K—ORF7），再经G-418／YPD筛选获得高拷贝重组菌，重组子经表型鉴定为Mut^＋。重组菌GS115