【摘 要】
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为合成与天然构象相似的干扰素γ蛋白,通过优化干扰素序列的密码子序列,利用杆状病毒表达系统合成真核重组牛IFN-γ蛋白。实验化学合成牛IFN-γ基因,并将该基因克隆至真核表
【机 构】
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中国动物疫病预防控制中心,新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心,中国农业科学院兰州兽医研究所
【基金项目】
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国家重点计划研发项目(2016YFD0500901),现代农业人才支撑计划(2130106-024),跨境动物疫病防控机制建设(2130114-FK),农业技术实验示范与服务支持(净化)(2130106-039)
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为合成与天然构象相似的干扰素γ蛋白,通过优化干扰素序列的密码子序列,利用杆状病毒表达系统合成真核重组牛IFN-γ蛋白。实验化学合成牛IFN-γ基因,并将该基因克隆至真核表达载体pFastBacHTA中,将构建成功的重组载体与DH10Bac感受态大肠杆菌进行转座形成穿梭载体,穿梭载体质粒瞬时转染至SF9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒,最后利用SF9昆虫细胞悬浮培养大量表达目的蛋白。蛋白纯化后经Western Blotting和BOVIGAM牛分枝杆菌IFN-γELISA检测试剂盒检测分析,具有较好的免疫原性和
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