猪α干扰素在BHK-21细胞中的表达与生物活性分析

来源 :石河子大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：PeterWang9898

【摘要】

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为了构建猪α-干扰素（PoIFN-α）的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1（＋）载体,并转染BHK-2

【作者】

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肖红冉王大伟贺志锐王鹏雁倪伟胡圣伟陈创夫

【机构】

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石河子大学动物科技学院

【出处】

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石河子大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2013年2期

【关键词】

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猪Α干扰素 BHK-21细胞生物活性分析 porcine alpha interferon BHK-21 cell bioactivity analysis

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（31260534）, 国家青年科学基金项目（31201800）

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为了构建猪α-干扰素（PoIFN-α）的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1（＋）载体,并转染BHK-21细胞。通过G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用real-time PCR及ELISA测定PoIFN-α基因在BHK-21细胞内的表达,利用淋巴细胞增值试验（MTT）检测表达蛋白的生物学活性。结果表明：稳定整合PoIFN-α基因的BHK-21细胞系其PoIFN-αmRNA的转录效率比阴性对照组提高1.

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