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摘 要：为了解徐州地区鸡群白血病的感染情况，从2013年3月到2013年12月在徐州部分地区的鸡场随机采样500份，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测gp27抗原阳性率以及J亚型白血病（ALV-J）和AB亚型白血病（ALV-AB）的抗体阳性率。调查显示，徐州大多数鸡场均存在白血病的感染，其中ALV-J为阳性的鸡场有8所，ALV-J最高阳性率达28.6%，ALV-AB最高阳性率为23.3%，ALV-AB感染的年龄段存在一定差异，感染率最高的年龄段是75周龄;肉鸡ALV-J、ALV-AB感染率较高，蛋鸡也存在ALV-J感染的情况，说明ALV-J的宿主范围正在扩大。
关键词：禽白血病;ELISA;血清;gp27
中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2015）03-0048-03
禽白血病（ Avian leucosis，AL） 是由禽白血病/肉瘤病毒群的病毒引起的禽类（主要是鸡）各种良性和恶性肿瘤的一群疾病[1]。白血病病毒（ALV）是反转录病毒，目前发现有10种亚群，其中A、B、C、D、E和J亚群常见于鸡，A亚群、B亚群和J亚群是最为常见的外源性病毒，也是危害养鸡业最大的三个亚群。
J亚群禽白血病（AL-J）是由J亚群禽白血病病毒（ALV-J）引起的以骨髓细胞瘤为特征的鸡的种源性传染病[2]，J亚群禽白病病毒是20世纪80年代末 Payne等[3]首先从肉用型鸡中分离鉴定出来的禽白血病病毒新的亚群，也是发现最晚的亚群。AL可通过两种方式传播感染鸡群，水平方式和垂直方式。鸡群感染此病会导致严重的经济损失，一是产生肿瘤，导致鸡的死亡;二是生产指标下降，表现为产生非肿瘤综合征[4]。如性成熟推迟、母鸡产蛋率下降、蛋重下降、受精率下降和孵化率下降，由此严重影响养鸡业的经济效益。
本实验采用ELISA法检测样本，因为ELISA法能高效检测到蛋清中的ALSV抗原，具有敏感、简便、快捷、适用于大面积检测的特点，在种群净化中得到了广泛的应用。在对抗原的检测中，我们检测的是所有亚群病毒所共同拥有的核衣壳蛋白gp27。不论外源性病毒或内源性的E亚群病毒都可以产生gp27，而且在一些鸡的基因组中还可能含有能表达gp27的基因片段，也能产生gp27，从而干扰了检测结果。但如果我们同时结合抗体检测，则可确定该鸡群确实发生或有过相应的外源性禽白血病感染;另一方面，ELISA诊断试剂盒在我国还未实现商品化。随着我国养禽业的发展以及科研、生产和检疫的需要，建立高效、实用的禽白血病检测方法，研究和控制禽白血病将是今后的重要任务。
因此，无论从经济角度考虑，还是从人的健康出发，研究和控制禽白血病都是至关重要的。
1 材料与方法
1.1 样本来源 由徐州疾病预防控制中心的工作人员在徐州各养殖场采集的样本。采集了徐州贾汪区、铜山县、云龙区、泉山区、鼓楼区、睢宁县、邳州市、新沂市、开发区、远大鸡场的10个品种（ 系）、1～75周龄的鸡群共采集血液样本500 份，分离后取血清，置于-20℃冰柜中保存，记录其来源、品种（系）、周龄、发病等情况。
1.2 检测方法 采用ELISA对采集的血清样本先进行gp27抗原检测，将检测结果为阳性的血清样品再进行ALV-J检测，试剂盒由美国IDEXX公司生产，ALV-J、ALV-AB批号分别为09268-AG448、09257-EG278，具体操作方法严格按照检测试剂盒的说明书执行。
2 结果
2.1 不同周龄鸡群ALV-AB的感染情况 经过调查我们知道远大鸡场提供的100份样品是肉种鸡的血清，由表1可知，17周龄以下的30份血清中，AB亚型阳性数2份，阳性率为6.7%;18～47 周龄的40份血清中，AB亚型阳性数 5份，阳性率为12.5%;在75 周龄的30份血清中，AB亚型阳性数7份，阳性率为23.3%。不同周龄的鸡群感染情况存在着较大的差异。
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2.2 不同县区感染gp27检测结果的比较 共检测徐州鼓楼区、贾汪区、铜山县、邳州市、泉山区、云龙区、睢宁县、新沂市、开发区，9个地区400份血清样本。由表2可知，每个鸡场都感染过gp27抗原，鸡场感染最高阳性率达38.3%，鸡场感染最低阳性率达15.6%，从表格数据也可以看出规模化养殖的地区的禽白血病阳性率普遍偏高，因此我们认为养殖规模也是影响禽白血病感染的重要因素。
■
2.3 不同县区感染ALV-J检测结果的比较 通过检测将gp27呈阳性的血清挑选出来并标记，再用gp85试剂盒检测，若结果呈阳性，则为ALV-J亚型，由表3可知，在徐州部分地区ALV-J阳性率最高的地区是开发区达到了23.8%，泉山区的为0，说明禽白血病的感染情况有地区差异。
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3 讨论
从检测结果可以看出徐州地区普遍存在禽白血病的感染，但感染的情况并不一致。同一种鸡在不同周龄的情况下比较其感染程度，从结果看出，不同周龄都出现了感染情况，有关资料表明自然病例可于14周龄后的任何时间发病， 但通常以性成熟时的发病率最高[5]。
比较不同品种鸡的 ALV-J感染情况，由实验结果可知这与国内近期研究结果相一致，即 ALV-J主要发生于肉用型鸡[6-10]。但是此次调查也表明，徐州市的一些蛋鸡已经发生了ALV-J的感染，说明 ALV-J的宿主范围正在扩大[11]。
此次调查的鸡为祖代鸡，是优质遗传资源。尽管部分鸡感染ALV-J后在临床上未出现病状，肉眼能观察到的典型病变也很少，但对生产性能有十分显著的影响，已逐渐成为制约地方品种鸡产业健康发展的瓶颈问题之一。因此，有必要尽快采取净化等综合防控措施来控制其发展，为做好徐州地方品种鸡的保种和选育工作奠定基础。
参考文献：
[1] 乔彩霞，关云涛，陈洪岩. 禽白血病研究进展[J].动物医学进展，2003，24（6）：18-21.
[2] 崔治中.鸡白血病及其鉴别诊断和预防控制[J].中国家禽，2010，32（8）：1-12.
[3] PAYNE L N， BROWN S R， BUMSTEAD N， et al. A novelsubgroup of exogenous avian leukosis virus in chickens [J].Gen Virol，1991，72：801-807.
[4] 马秀丽.鸡病毒性免疫抑制病的发展趋势与防制措施 [J].山东畜牧兽医，2000，（2）：37.
[5] 张胜斌，吴天威，韦平，等.地方优良鸡种禽白血病病毒感染调查及净化[J].中国家禽，2010.32（12）：11-16.
[6] 高玉龙，邵华斌，罗青平，等.2009年我国部分地区禽白血滴分子流行病学调查[J].中国预防兽医学报，2010，32（1）：33-35.
[7] 崔治中.我国鸡群中禽白血病的流行现状和对策[J].中国家禽，2009，31（13）：1-3.
[8] 张丹俊，潘孝成，赵瑞宏，等.黄羽肉种鸡 J 亚群白血病病例诊断初报[J].中国畜牧兽医，2008，35（2）：119-120.
[9] 杨玉莹，粱雄燕，余连喜，等.湖北蛋鸡群血管瘤型ALV-J血清学检测和PCR诊断[J].湖北农业科学，2011，50（6）：1211-1213.
[10] 秦立廷，高玉龙，潘伟，等.我国部分地区蛋鸡群 ALV-J及于REV、MDV、CAV混合感染检测[J].中国预防兽医学报，2010，32（2）：90-93.
[11] 齐新永，孙泉云，陈关明，等.上海地区蛋鸡 J 亚群禽白血病的血清学调[J].动物医学进展，2007，28（11）：110-111
关键词：禽白血病;ELISA;血清;gp27
中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2015）03-0048-03
禽白血病（ Avian leucosis，AL） 是由禽白血病/肉瘤病毒群的病毒引起的禽类（主要是鸡）各种良性和恶性肿瘤的一群疾病[1]。白血病病毒（ALV）是反转录病毒，目前发现有10种亚群，其中A、B、C、D、E和J亚群常见于鸡，A亚群、B亚群和J亚群是最为常见的外源性病毒，也是危害养鸡业最大的三个亚群。
J亚群禽白血病（AL-J）是由J亚群禽白血病病毒（ALV-J）引起的以骨髓细胞瘤为特征的鸡的种源性传染病[2]，J亚群禽白病病毒是20世纪80年代末 Payne等[3]首先从肉用型鸡中分离鉴定出来的禽白血病病毒新的亚群，也是发现最晚的亚群。AL可通过两种方式传播感染鸡群，水平方式和垂直方式。鸡群感染此病会导致严重的经济损失，一是产生肿瘤，导致鸡的死亡;二是生产指标下降，表现为产生非肿瘤综合征[4]。如性成熟推迟、母鸡产蛋率下降、蛋重下降、受精率下降和孵化率下降，由此严重影响养鸡业的经济效益。
本实验采用ELISA法检测样本，因为ELISA法能高效检测到蛋清中的ALSV抗原，具有敏感、简便、快捷、适用于大面积检测的特点，在种群净化中得到了广泛的应用。在对抗原的检测中，我们检测的是所有亚群病毒所共同拥有的核衣壳蛋白gp27。不论外源性病毒或内源性的E亚群病毒都可以产生gp27，而且在一些鸡的基因组中还可能含有能表达gp27的基因片段，也能产生gp27，从而干扰了检测结果。但如果我们同时结合抗体检测，则可确定该鸡群确实发生或有过相应的外源性禽白血病感染;另一方面，ELISA诊断试剂盒在我国还未实现商品化。随着我国养禽业的发展以及科研、生产和检疫的需要，建立高效、实用的禽白血病检测方法，研究和控制禽白血病将是今后的重要任务。
因此，无论从经济角度考虑，还是从人的健康出发，研究和控制禽白血病都是至关重要的。
1 材料与方法
1.1 样本来源 由徐州疾病预防控制中心的工作人员在徐州各养殖场采集的样本。采集了徐州贾汪区、铜山县、云龙区、泉山区、鼓楼区、睢宁县、邳州市、新沂市、开发区、远大鸡场的10个品种（ 系）、1～75周龄的鸡群共采集血液样本500 份，分离后取血清，置于-20℃冰柜中保存，记录其来源、品种（系）、周龄、发病等情况。
1.2 检测方法 采用ELISA对采集的血清样本先进行gp27抗原检测，将检测结果为阳性的血清样品再进行ALV-J检测，试剂盒由美国IDEXX公司生产，ALV-J、ALV-AB批号分别为09268-AG448、09257-EG278，具体操作方法严格按照检测试剂盒的说明书执行。
2 结果
2.1 不同周龄鸡群ALV-AB的感染情况 经过调查我们知道远大鸡场提供的100份样品是肉种鸡的血清，由表1可知，17周龄以下的30份血清中，AB亚型阳性数2份，阳性率为6.7%;18～47 周龄的40份血清中，AB亚型阳性数 5份，阳性率为12.5%;在75 周龄的30份血清中，AB亚型阳性数7份，阳性率为23.3%。不同周龄的鸡群感染情况存在着较大的差异。
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2.2 不同县区感染gp27检测结果的比较 共检测徐州鼓楼区、贾汪区、铜山县、邳州市、泉山区、云龙区、睢宁县、新沂市、开发区，9个地区400份血清样本。由表2可知，每个鸡场都感染过gp27抗原，鸡场感染最高阳性率达38.3%，鸡场感染最低阳性率达15.6%，从表格数据也可以看出规模化养殖的地区的禽白血病阳性率普遍偏高，因此我们认为养殖规模也是影响禽白血病感染的重要因素。
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2.3 不同县区感染ALV-J检测结果的比较 通过检测将gp27呈阳性的血清挑选出来并标记，再用gp85试剂盒检测，若结果呈阳性，则为ALV-J亚型，由表3可知，在徐州部分地区ALV-J阳性率最高的地区是开发区达到了23.8%，泉山区的为0，说明禽白血病的感染情况有地区差异。
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3 讨论
从检测结果可以看出徐州地区普遍存在禽白血病的感染，但感染的情况并不一致。同一种鸡在不同周龄的情况下比较其感染程度，从结果看出，不同周龄都出现了感染情况，有关资料表明自然病例可于14周龄后的任何时间发病， 但通常以性成熟时的发病率最高[5]。
比较不同品种鸡的 ALV-J感染情况，由实验结果可知这与国内近期研究结果相一致，即 ALV-J主要发生于肉用型鸡[6-10]。但是此次调查也表明，徐州市的一些蛋鸡已经发生了ALV-J的感染，说明 ALV-J的宿主范围正在扩大[11]。
此次调查的鸡为祖代鸡，是优质遗传资源。尽管部分鸡感染ALV-J后在临床上未出现病状，肉眼能观察到的典型病变也很少，但对生产性能有十分显著的影响，已逐渐成为制约地方品种鸡产业健康发展的瓶颈问题之一。因此，有必要尽快采取净化等综合防控措施来控制其发展，为做好徐州地方品种鸡的保种和选育工作奠定基础。
参考文献：
[1] 乔彩霞，关云涛，陈洪岩. 禽白血病研究进展[J].动物医学进展，2003，24（6）：18-21.
[2] 崔治中.鸡白血病及其鉴别诊断和预防控制[J].中国家禽，2010，32（8）：1-12.
[3] PAYNE L N， BROWN S R， BUMSTEAD N， et al. A novelsubgroup of exogenous avian leukosis virus in chickens [J].Gen Virol，1991，72：801-807.
[4] 马秀丽.鸡病毒性免疫抑制病的发展趋势与防制措施 [J].山东畜牧兽医，2000，（2）：37.
[5] 张胜斌，吴天威，韦平，等.地方优良鸡种禽白血病病毒感染调查及净化[J].中国家禽，2010.32（12）：11-16.
[6] 高玉龙，邵华斌，罗青平，等.2009年我国部分地区禽白血滴分子流行病学调查[J].中国预防兽医学报，2010，32（1）：33-35.
[7] 崔治中.我国鸡群中禽白血病的流行现状和对策[J].中国家禽，2009，31（13）：1-3.
[8] 张丹俊，潘孝成，赵瑞宏，等.黄羽肉种鸡 J 亚群白血病病例诊断初报[J].中国畜牧兽医，2008，35（2）：119-120.
[9] 杨玉莹，粱雄燕，余连喜，等.湖北蛋鸡群血管瘤型ALV-J血清学检测和PCR诊断[J].湖北农业科学，2011，50（6）：1211-1213.
[10] 秦立廷，高玉龙，潘伟，等.我国部分地区蛋鸡群 ALV-J及于REV、MDV、CAV混合感染检测[J].中国预防兽医学报，2010，32（2）：90-93.
[11] 齐新永，孙泉云，陈关明，等.上海地区蛋鸡 J 亚群禽白血病的血清学调[J].动物医学进展，2007，28（11）：110-111