目的建立柴胡中酰化柴胡皂苷含量的测定方法。方法采用单因素分析和正交实验设计法,选择氨水浓度、超声时间、超声功率为因素各取3水平,按L9(34)正交表进行实验,优化柴胡中酰化柴胡皂苷的水解方法。采用HPLC测定柴胡皂苷的含量。色谱条件为Wonda Sil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-水(53∶47);流速:1.0 m L·min-1;检测波长:210 nm。结果优化的柴胡中酰化柴胡皂苷水解方法为浓氨水的浓度为23%,超声25 min,超声的功率为350 W。基于所测定的样品中酰化柴胡皂苷的含量结果,柴胡药材中酰化柴胡皂苷的含量相低于柴胡皂苷,且在柴胡皂苷含量的70%以下。结论该方法简便可靠,可用于柴胡中酰化柴胡皂苷的含量测定。为准确评价柴胡药材质量提供参考。