普通变形杆菌TWN-3株基因组文库构建及免疫印迹筛选

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在从患病大口鲇中分离到普通变形杆菌TWN-3株的基础上,将该菌总DNA用EeoRI不完全酶切后,分离5kb左右的片段,连接人pUC18质粒,转化EcoliBL21,构建基因组文库,得到3.6×10^3个重组子,远大于理论计算的1831个重组子,随机挑选重组子经EeoRI酶切鉴定重组率为100%,文库构建成功;将该菌裂解液与佐剂混合,免疫雄性新西兰大白兔,免疫程序结束后,抽血并分离血清,对用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后的文库进行免疫印迹筛选,最终得到8个阳性克隆子。本实验为该菌的
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