【摘 要】
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目的建立单克隆抗体药物消光系数测定方法,用于单克隆抗体药物的鉴别和紫外分光光度法的定量分析,并对其进行初步评价。方法使用6 mol/L盐酸胍对抗体进行变性处理,打开抗体折
【基金项目】
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广东省引进创新科研团队计划(201101Y0104990178)
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目的建立单克隆抗体药物消光系数测定方法,用于单克隆抗体药物的鉴别和紫外分光光度法的定量分析,并对其进行初步评价。方法使用6 mol/L盐酸胍对抗体进行变性处理,打开抗体折叠的高级结构,将其当作是色氨酸、酪氨酸和"S-S"键的三元体系,通过检测相同浓度下折叠和非折叠抗体在紫外280 nm波长处的吸光值,计算抗体的消光系数,并进行方法的精密度验证。结果两种单克隆抗体m Ab1和m Ab2在280 nm波长处的消光系数平均值分别为1.702和1.387 m L/(mg·cm);两位实验员检测的消光系数各自相对标准偏差分别为0.48%和0.87%,总相对标准偏差为0.69%,均小于1%,表明方法精密度良好。结论建立的方法操作简单,不依赖于抗体浓度,不破坏其二硫键结构,结果准确,可用于单克隆抗体药物消光系数的测定。
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