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根椐GenBank中已发表的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）2种病毒基因序列，分别设计2对引物。在建立2种病毒单项一步法RT-PCR检测方法的基础上，优化一步法二重RT-PCR反应条件，建立了2种病毒的一步法二重RT-PCR检测方法，用这2对引物对同一样品中的美洲型PRRSV、欧洲型PRRSV核酸模板进行一步法二重RT-PCR扩增，结果可同时扩增美洲型PRRSV的265bp和欧洲型PRRSV的451bp的特异性片段，而对其他4种猪病原的扩增结果均为阴性