杂色曲霉素(STG)是黄曲霉毒素B1在体内代谢的前体,其对人和动物的毒性作用及致癌作用是众所周知的,为得到STG的单克隆抗体,本试验利用一种可靠快速的方法将STG与BSA进行偶联,得到了STG的衍生物。以这种新合成的STG-BSA偶联物为抗原,通过改进的两步法HAT培养基进行筛选,最终得到3株敏感性、特异性良好的STG单克隆抗体,将其命名为VerA3、VerA4和VerA6。这3株单克隆抗体对STG有高度亲和力,而对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2则无交叉反应。本试验利用最敏感的抗体株VerA3建立了一种超灵敏cELSIA法用于检测小麦、玉米、花生中的STG。包被原浓度为0.5μg/mL,抗体浓度1∶80000。对影响测定性能的几个物理因素,如pH、离子强度、封闭液及样品稀释液进行了优化。结果显示,该方法的检测限分别为小麦0.08ng/g、玉米0.06ng/g、花生0.1ng/g,批间和批内变异系数均小于10%,回收率为83%~110%。这些回收率与HPLC-MS/MS回收率(90%~104%)一致。结果表明该抗体VerA3在粗粮作物中STG含量的研究中是非常有用的。