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5. EBV-LMP1 C端RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选

EBV-LMP1 C端RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fgq8022

【摘 要】

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目的探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选。方法用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95．8细胞中扩增EBV-LMP1 exon c，重组入pGEM-11zf载体，并

【作 者】

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杨玉成 王袆琴 钱迪 何芸 黄江菊 洪苏玲 

【机 构】

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重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科

【出 处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2006年24期

【关键词】

：

体外转录 EB病毒 潜伏膜蛋白1(LMP1) 脱氧核酶 in vitro transcription   Epstein-Barr virus   latent 

【基金项目】

：

重庆市卫生局资助重点项目（2003） 致谢：本研究在重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部（省部共建）重点实验室完成,感谢各位老师无私的指导和帮助!

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目的探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选。方法用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95．8细胞中扩增EBV-LMP1 exon c，重组入pGEM-11zf载体，并用T7RNA聚合酶对其进行体外转录制备EBV—LMP1C端RNA。根据该RNA的一、二级结构设计合成3种靶向10—23脱氧核酶，据体外剪切效率筛选高效特异的靶向脱氧核酶。结果成功地构建含EBV—LMP1 exon c基因的重组质粒，用体外转录方法用1 μg质粒转录出40．25μg高纯度的EBV-L

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