沉默转化生长因子β诱导基因对糖尿病大鼠肾组织内Smad2、P-smad2及Ⅳ型胶原表达的影响

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目的 探讨沉默转化生长因子β诱导基因(TIEG-siRNA)对糖尿病大鼠肾组织Smad2、p-shred2及Ⅳ型胶原表达的影响.方法 链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型10只,分为空载体组和TIEG-siRNA治疗组,另以5只正常大鼠作为对照组.治疗组和空载体组分别给予TIEG-siRNA病毒液和空载体质粒0.5 ml,于0、72 h两次尾静脉注射,于成模后4周处死.实时荧光定量PCR检测大鼠肾组织内TIEG-mRNA的表达水平,免疫组织化学检测肾组织Smad2、p-smad2、Ⅳ型胶原蛋白表达.Western印迹检测大鼠肾组织Smad2,p-smad2蛋白表达水平.结果 TIEG-mRNA表达在TIEG-siRNA 治疗组(0.0636±0.0066)较空载体组(0.1054±0.0111)明显下调(P<0.05),免疫组化半定量结果示Smad2蛋白表达在治疗组[(2.13±0.19)%]较空载体组[(2.53±0.34)%]明显减少(P<0.05),p-smad2蛋白和Ⅳ型胶原表达在TIEG-siRNA治疗组较空载体组明显减少[(21.77±2.00)%比(27.03±2.51)%,(3.67士0.42)%比(4.85±0.43)%,P<0.05].Western印迹显示Smad2在治疗组比空载体组明显减少(0.32±0.09比0.50±0.04,P<0.05).P-smad2在治疗组比空载体组明显减少(0.16±0.01比0.32±0.02,P<0.05).结论 TIEG-siRNA可以通过影响糖尿病大鼠肾脏内Smad2表达及其活化,从而下调Ⅳ型胶原表达来延缓糖尿病纤维化进程。

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