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目的探讨重组腺病毒载体的HGF体外转染兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可行性,然后利用流式细胞仪检测目的基因的转染效率,ELISA和免疫组化检测转染后外源基因HGF的表达。方法携带HGF(hepatocyte growth factor)基因和绿色荧光蛋白(green fluorescene protein,GFP)的重组腺病毒载体AdHGF、Ad-GFP,均由兰州军区总医院哈小琴教授提供。以不同感染复数(multiple of infection,MOI)的GFP载体转染BMSCs,流式细胞检测表达GFP阳性细胞率。以MOI=150时Ad-HGF转染BMSCs,ELISA检测和免疫细胞化学检测HGF表达;流式细胞仪检测HGF-BMSC细胞表面标志物和诱导分化培养,以确定基因转染后细胞生物学特性有无变化;同时transwell检测HGF介导BMSCs细胞迁移能力。结果在Ad-GFP以不同MOI转染兔BMSCs 48 h后,GFP的细胞阳性表达率具有明显差异(P<0.05)。在MOI=150时,表达GFP阳性细胞率>98%;在MOI>150时,表达GFP阳性细胞率不具有明显差异(P>0.05)。因此,选择MOI=150时转染BMSCs。以MOI=150将Ad-HGF转染兔BMSCs后,ELISA法和免疫细胞化学法检测结果均显示:HGF蛋白在细胞培养液和胞浆内均具有丰富的表达,表明Ad-HGF转染BMSCs高效,HGF蛋白在BMSCs中高表达。流式细胞仪检测和诱导分化培养结果显示,腺病毒感染和HGF基因修饰不改变BMSC表型和分化潜能。同时实验结果显示,HGF对BMSC具有极强的趋化作用。结论 Ad-GFP转染BMSCs可行,在MOI=150时转染BMSCs,可以获得最高的转染效率,转染效率>98%,转染24 h即可见绿色荧光,2~4 d转染率最高;表明重组腺病毒作为载体转染BMSCs,具有高转染率和稳定表达。HGF腺病毒表达载体Ad-HGF转染BMSCs不改变BMSCs的固有特性;经过ELISA和免疫组化检测,BMSCs可以高表达HGF蛋白。HGF对BMSC具有明显的趋化作用。