【摘 要】
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观察白藜芦醇(resveratrol,Res)对高糖培养条件下的大鼠肾小管上皮细胞第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)表达的影响,探讨Res减轻高糖条件下肾小管上皮细胞纤维化病变效应的作用及可能机制.将高糖培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)给予Res或PTEN抑制剂SF1670预处理后,分别设正常糖组(NG)、正常糖+SF1670组(NS)、高糖组(HG)、高糖+
【机 构】
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贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室,贵州贵阳550025;贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳550025;贵州省黔东南苗族侗族自治州中医医院影像科,贵州凯里556000
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观察白藜芦醇(resveratrol,Res)对高糖培养条件下的大鼠肾小管上皮细胞第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)表达的影响,探讨Res减轻高糖条件下肾小管上皮细胞纤维化病变效应的作用及可能机制.将高糖培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)给予Res或PTEN抑制剂SF1670预处理后,分别设正常糖组(NG)、正常糖+SF1670组(NS)、高糖组(HG)、高糖+SF1670组(HS)、高糖+不同浓度(5、10、25μmol· L-1)Res处理组.采取免疫荧光细胞化学法观察E-cadherin、α-SMA在肾小管上皮细胞中的表达和分布;Western blot法检测PTEN、E-cadherin、α-SMA、p-Akt(Thr308)、collagenⅣ蛋白的表达变化;real-time PCR法检测PTEN mRNA的表达水平.结果 显示,与NG组相比,HG组PTEN mRNA和蛋白表达减少,E-cadherin蛋白表达减少,而α-SMA、p-Akt(Thr308)、collagen Ⅳ蛋白表达增多.与HG组相比,随Res剂量增加,PTEN mRNA和蛋白表达水平逐渐上调,E-cadherin蛋白表达水平逐渐上调,α-SMA、collagenⅣ、p-Akt(Thr308)蛋白表达水平逐渐下调,呈量效依赖性.与NG组相比,NS组无明显差异.与HG组相比,HS组E-cad-herin蛋白表达进一步减少,α-SMA、p-Akt(Thr308)、collagenⅣ蛋白表达进一步增多,而PTEN mRNA和蛋白表达无明显差异.使用PTEN抑制剂后不影响PTEN,但其他蛋白表达变化均与Res处理后的效应相反,且加重了纤维化病变效应,提示SF1670产生作用是通过抑制PTEN,激活Akt,增加collagenⅣ等细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的合成,从而促进纤维化.结果 表明,Res可拮抗高糖介导的肾小管上皮细胞纤维化病变效应,其机制可能是通过上调PTEN抑制PI3K/Akt信号通路而实现的.
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