【摘 要】
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目的 研究体外缺氧刺激后视网膜Müller细胞是否存在未折叠蛋白反应(unfolded protein reaction,UPR),及其与L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(glutamate-aspartate =transporte
【机 构】
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710032 陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科,全军眼科研究所
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目的 研究体外缺氧刺激后视网膜Müller细胞是否存在未折叠蛋白反应(unfolded protein reaction,UPR),及其与L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(glutamate-aspartate =transporters,GLAST)的关系.方法 出生3~7d大鼠视网膜组织采用胰蛋白酶消化法培养视网膜Müller细胞,氯化钴(CoCl2)200 μmol·L-对视网膜Müller细胞进行体外缺氧干预,干预时间为0h、3h、6h、12 h、24h、48 h、72 h;UPR诱导剂二硫苏糖醇(DTT)2 mmol·L-刺激视网膜Müller细胞为阳性对照,干预时间为0h、3h、6h、12h、24 h、48 h、72 h.采用实时荧光定量PCR检测GLAST与UPR相关因子X盒结合蛋白1、C/EBP同源蛋白的表达并分析其相关性.结果 视网膜Müller细胞鉴定:细胞免疫荧光染色示90%以上细胞GS、GLAST表达阳性;流式细胞仪检测结果:Müller细胞的GLAST表达阳性率为(84.66±3.51)%.缺氧刺激后,GLAST与X盒结合蛋白1、C/EBP同源蛋白在Müller细胞上均有表达,缺氧早期呈上升趋势,干预后24h表达最强,后呈下降趋势.DTT干预组表达趋势与缺氧干预组一致.结论 体外缺氧刺激后视网膜Müller细胞存在UPR,其相关因子的变化与GLAST的变化趋势一致,提示UPR可能是调控GLAST变化的原因之一.
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