介绍一种鉴定胚胎干细胞基因打靶快速、经济的筛选新方法

来源 :实验生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:benq702
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小鼠基因剔除动物模型越来越广泛地应用于哺乳动物基因功能与疾病的研究.然而每当胚胎干细胞同源重组的效率过低时,鉴定与分离带有定位变异的阳性克隆就会既费力又昂贵.本工作以类固醇受体共激活子基因为例,研究出一种快速鉴定阳性克隆的新方法.在构造重组载体时,将一段编码半乳糖苷酶的DNA序列整合到共激活子基因的蛋白起始码后面.于是,在于细胞内同源重组发生以后,半乳糖苷酶的表达就会受控于内源性共激活子基因的启动子.在载体与半乳糖苷酶DNA随机整合的大多数非特异克隆中,因为缺少启动子或由于不正确的氨基酸编码连接,导致合成
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