【摘 要】
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目的转染 pcDNA3HO1入人血管内皮细胞( HUVEC)并表达,研究血红素加氧酶 -1( HO-1)保护细胞凋亡的作用.方法将构建好的质粒用 DOTAP包裹转入细胞中表达.用 CCLR破碎细胞后, SD
【机 构】
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上海交通大学生命科学技术学院,上海,200030;上海第二医科大学附属瑞金医院儿内科
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目的转染 pcDNA3HO1入人血管内皮细胞( HUVEC)并表达,研究血红素加氧酶 -1( HO-1)保护细胞凋亡的作用.方法将构建好的质粒用 DOTAP包裹转入细胞中表达.用 CCLR破碎细胞后, SDS-PAGE鉴定表达量,采用 TNF-α诱导细胞凋亡,以流式细胞仪测定细胞的凋亡率;采用 Hemin 和 SnPP分别刺激细胞,促进和抑制 HO-1在细胞中的表达.结果经 Hemin处理后细胞的凋亡率均在 20%以下,而 SnPP处理后细胞的凋亡率大幅上升,最高可达到 95%以上.实验数据显示 HO-1基因表达被抑制时细胞凋亡率是诱导时的 5～ 20倍. 结论细胞凋亡率与质粒转染效率和 HO-1表达量均成反比,提示 HO-1对细胞有保护作用,可以抑制细胞凋亡,在临床具有广泛的应用前景.
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