论文部分内容阅读
目的：构建含有IL-1基因的原核表达质粒,并对其原核表达情况进行检测,验证pHisSUMO表达载体的高效可溶性表达。方法：以质粒pMD18-T-IL-1为模板,利用PCR获得IL-1基因克隆并将其与表达载体pET、pTYB、pHisSUMO连接,重组质粒经鉴定后转化到大肠杆菌DH5α中,并检测其蛋白表达情况。结果：仅在pHisSUMO表达系统获得了IL-1融合蛋白的高效可溶性表达。利用Ni-NTA纯化后的融合蛋白经SUMO蛋白酶Ⅰ切割,获得了纯度较高的成熟蛋白且不残留任何氨基酸残基。结论：实验证明pHis