人J链基因的克隆及原核表达研究

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:c_zhang08
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目的用基因工程技术在大肠埃希菌中表达人J链基因重组蛋白,为研究其功能及开发检测J链抗原的试剂盒奠定基础。方法提取人脾细胞总RNA,以此为模板,通过RT-PCR的方法获得J链基因。将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,构建J链表达载体,测序证实正确后转化至EcoliBL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE,表达产物经免疫印迹法(western blot,WB)鉴定其免疫反应性。结果测序结果证实笔者成功地获得了J链基因,其序列与GenBank中报道完全一致。SDS-PAGE分析表明,
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