【摘 要】
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目的探讨细胞自噬在PM2.5诱导细胞凋亡过程中的作用机制。方法采集2016年湛江市细颗粒物PM2.5,再用不同浓度PM2.5,分不同时间处理人肺腺癌(H441)细胞;用MTT比色法检测细胞增
【机 构】
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广东医科大学附属医院呼吸内科,广东医科大学附属医院临床医学研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(81570062);广东省医学科研基金(A2017027);广东医科大学科研基金(M2016001)
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目的探讨细胞自噬在PM2.5诱导细胞凋亡过程中的作用机制。方法采集2016年湛江市细颗粒物PM2.5,再用不同浓度PM2.5,分不同时间处理人肺腺癌(H441)细胞;用MTT比色法检测细胞增殖;PI和annexin V双染及TUNEL法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测自噬标志物LC3Ⅱ及AKT和P-AKT蛋白表达。将H441细胞用雷帕霉素或3-MA预处理后,再用PM2.5暴露处理,锥虫蓝染色检测细胞活力。结果与对照组相比,100μg/m L以上PM2.5处理24和48 h组细胞增殖明显受到抑制;随着PM2.5作用浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,LC3Ⅱ蛋白的表达明显增多,P-AKT蛋白表达明显减少;而使用AKT抑制剂后,LC3Ⅱ蛋白增加愈明显;PM2.5暴露下,应用雷帕霉素能够降低PM2.5引起的细胞凋亡,而3-MA可促进PM2.5引起的细胞凋亡。结论在H441细胞中,PM2.5通过抑制AKT活化而激活细胞自噬发生,而细胞自噬能够减缓PM2.5诱导的细胞凋亡。
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