目的 探讨山柰酚（KAE）对脑缺血/再灌注（CI/R）损伤的体内外保护作用机制。方法 首先利用网络药理学方法初步筛选KAE治疗CI/R损伤的潜在作用靶点。然后采用AutoDock Vina软件将KAE分别与排名前10位的核心靶点进行分子对接，以结合亲和力作为评价标准，进一步明确KAE治疗CI/R损伤的可能作用机制。最后通过体内外实验验证以上结果，即构建氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）HT22细胞损伤模型和大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠模型，采用CCK-8法检测细胞活性，分别对大鼠及其脑组织进行神经功能评分和TTC染色，采用Western blot法检测HT22细胞和大鼠脑组织中蛋白激酶B（Akt）、Src蛋白的磷酸化水平。结果网络药理学筛选结果显示，KAE治疗CI/R损伤与前列腺素内过氧化物合成酶2、基质金属蛋白酶9、JUN、Akt1、肿瘤坏死因子、胱天蛋白酶3、丝裂原激活蛋白激酶8、细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1、Src蛋白10个核心靶点密切相关。分子对接结果显示，KAE与Akt1、Src蛋白结合稳定。体内外实验结果表明，KAE可显著提高OGD/R损伤HT22的细胞存活率（P＜0.05），显著降低MCAO模型大鼠的神经功能评分（P＜0.05），显著减小大鼠脑梗死体积（P＜0.05），显著升高HT22细胞和大鼠脑组织中Akt、Src蛋白的磷酸化水平（P＜0.05），且呈剂量依赖趋势。结论 KAE可能通过调控Akt、Src蛋白的磷酸化水平来发挥脑保护作用，从而治疗CI/R损伤。