人重组PSP及其生物活性研究

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wilsonpfan

【摘要】

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为了获得人重组persephin(PSP)并研究其生物学活性,从人胎脑组织中提取总RNA,以RT-PCR方法获取编码人PSP成熟蛋白cDNA.将人PSPcDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a(+),构建表达

【作者】

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陈哲宇郑兴东何志勇黄爱军路长林吴祥甫

【机构】

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第二军医大学神经生物学教研室,上海,200433中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031;第二军医大学神经生物学教研室,上海,200433;中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031;

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2000年5期

【关键词】

：

人PSP 基因克隆基因表达脊髓神经元

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为了获得人重组persephin(PSP)并研究其生物学活性,从人胎脑组织中提取总RNA,以RT-PCR方法获取编码人PSP成熟蛋白cDNA.将人PSPcDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a(+),构建表达质粒pET-PSP,转化大肠杆菌B121(DE3)获得表达菌株BLPSP,经IPTG诱导表达的PSP形成包含体.凝胶自动扫描分析表明,PSP表达量约占菌体总蛋白20%以上.用Ni2+-NTA树脂一步法纯化目的蛋白,纯度达85%以上.纯化和复性的PSP蛋白能显著促进脊髓神经元的存活.

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