β分泌酶RNA干扰质粒的构建与鉴定

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ziquan33071033

【摘要】

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选择人、小鼠和大鼠的BACEI基因的共有序列为干扰的靶标，设计4对干扰片段连接至带有GFP和U6 RNA聚合酶启动子的PRNATU6．1载体．将构建好的质粒转染HEK293T细胞，通过RT-PCR和Wester

【作者】

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潘岩朱文斌陈雪梅徐运

【机构】

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南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,南京大学生物医药国家重点实验室

【出处】

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生命科学研究

【发表日期】

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2007年3期

【关键词】

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Alzheimer’s病 RNAI Β分泌酶卢淀粉样肽 Alzheimer＇s disease RNAi β secretase β amyloid

【基金项目】

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江苏省自然科学基金资助项目（BK2005002）

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选择人、小鼠和大鼠的BACEI基因的共有序列为干扰的靶标，设计4对干扰片段连接至带有GFP和U6 RNA聚合酶启动子的PRNATU6．1载体．将构建好的质粒转染HEK293T细胞，通过RT-PCR和Western blotting的方法分别在RNA和蛋白水平上来检测BACEI和Aβ，以鉴定其干扰效率，并通过夹心ELISA的方法进一步在过表达蛋白APP和BACE1的HEK293T细胞体系中验证干扰质粒对Aβ1-42生成的影响．RT-PCR和Western blotting结果提示β分泌酶的siRNA能干扰B

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