【摘 要】
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目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10~+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和
【机 构】
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滨州医学院免疫学教研室,烟台市莱山区第一人民医院妇产科,烟台市中心血站,滨州医学院烟台附属医院检验科,
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目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10~+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和流式细胞术分别检测程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在h PMSC的表达;Ficoll密度梯度离心法分离脐血和健康成人外周血单个核细胞,并用红细胞花环法纯化T细胞;用植物血凝素(PHA)活化T细胞并与h PMSC进行共培养,流式细胞术分别检测在阻断型PD-L1 m Ab和IFN-γ预刺激的条件下h PMSC对脐血和外周血T细胞向CD4~+IL-10~+T细胞、CD8~+IL-10~+T细胞分化的诱导作用。结果 h PMSC可诱导脐血和外周血T细胞向CD4~+IL-10~+T细胞、CD8~+IL-10~+T细胞分化,且对外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化的诱导能力明显高于对脐血T细胞向该细胞分化的诱导能力;IFN-γ预处理h PMSC后,h PMSC促进脐血和外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化能力明显增强;h PMSC高表达PD-L1,IFN-γ可明显上调其在h PMSC上的表达;阻断PD-L1在h PMSC上表达后,脐血、外周血中CD4~+IL-10~+T细胞、CD8~+IL-10~+T细胞比例均明显降低。结论 h PMSC诱导外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化的能力明显高于其诱导脐血T细胞向该细胞分化的能力。IFN-γ可通过上调PD-L1在h PMSC上的表达,增强h PMSC对脐血和外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化的诱导能力。
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