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为建立和优化特色药食两用植物黑老虎(Kadsura coccinea)的ISSR-PCR反应体系和扩增程序,通过正交和单因素试验研究Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数等因素对黑老虎ISSR-PCR反应体系扩增效果的影响。结果表明,在20μL的反应体系中,最佳扩增条件为Mg2+浓度2.5 mmol/L、dNTPs浓度0.1 mmol/L、引物浓度0.6μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.50 U、模板DNA用量45 ng,退火温度50.4℃,循环40次。这