重组人野生型P53融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化

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目的研究wtP53蛋白对肿瘤的治疗效果,提供药用wtP53融合蛋白。方法在本室构建的人野生型P53融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X-P53的基础上,IPTG诱导大肠杆菌表达wtP53融合蛋白,通过亲和层析柱纯化和因子Xa处理,SDS-PAGE分离。结果通过IPTG诱导后,在大肠杆菌中获得人野生型P53融合蛋白的高效表达,经过亲和层析纯化和Western印迹实验,表明获得重组人野生型P53融合蛋白。结论原核细胞表达的人wtP53融合蛋白具有天然P53蛋白的抗原性,可用于P53蛋白的体内外活性鉴定,以
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