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目的
探讨PEF1（penta-EF-hand domain containing 1）对肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）复制和感染的影响。
方法采用小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）方法，敲低人恶性胚胎横纹肌肉瘤细胞（rhabdomyosarcoma，RD）中PEF1的表达，通过RT-PCR、蛋白免疫印迹（western blot，WB）实验检测siRNA的效率。通过RT-PCR、WB和空斑实验检测并比较对照细胞和PEF1敲低细胞中EV71的复制水平。利用免疫荧光检测EV71感染后PEF1在细胞中的定位。采用CRISPR-Cas9技术构建PEF1敲除的RD细胞系，并通过测序和WB实验验证敲除效果，同时使用WB实验检测PEF1敲除的细胞中EV71的复制。
结果siRNA能够显著降低RD细胞中PEF1的表达。EV71在PEF1敲低的细胞中的复制水平低于对照细胞。EV71感染后细胞内PEF1的表达水平并未发生改变，但是在细胞内的定位发生了改变。PEF1敲除细胞中EV71的复制水平也显著降低。
结论敲低或敲除PEF1的表达能抑制EV71的复制，EV71感染并不影响PEF1的表达但改变其在细胞内的定位。