【摘 要】
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目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)基因分型检测芯片方法,并检测其特异性、敏感性和稳定性.方法 收集HBV各基因型序列,并对比分析后,设计7支探针,制成HBV基因型检测芯片；对芯片检测
【机 构】
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新疆乌鲁木齐兵团中心血站,新疆乌鲁木齐,830002;新疆石河子人民医院,新疆乌鲁木齐,830002;新疆医科大学第一附属医院,新疆乌鲁木齐,830002;上海百傲生物科技公司,上海,200030
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目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)基因分型检测芯片方法,并检测其特异性、敏感性和稳定性.方法 收集HBV各基因型序列,并对比分析后,设计7支探针,制成HBV基因型检测芯片；对芯片检测的实验条件进行探索,分析其检测特性.结果 实验条件优化为杂交温度39℃,试验统计结果判定为荧光信号软件输出值在30以上为阳性,30以下为阴性.正常对照组的健康人和非HBV的常见病毒芯片检测结果均为阴性,实际应用检测30份HBV DNA阳性临床留取的样本,结果19份为C型,11份为B型,抽查2份标本测序观察,结果与芯片检测结果完全一致.用HBV基因B型、C型标准品考察,检测符合率为100％,芯片检测的最低病毒拷贝数为l04拷贝/ml,芯片检测的总变异度为9％、芯片内变异度为2％,芯片能同时检测不同基因型的重叠感染.用加速试验评价芯片的稳定性,结果检测荧光信号值有所下降,但下降后的信号值未低于检测临界值30,试剂盒性能较为稳定.结论 使用HBV基因型检测芯片进行HBV基因分型操作简便、敏感性高、特异性好、方法可靠.
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